关键词:分子生物学技术;食品微生物检测;应用
一、常规PCR技术
常规PCR技术,即有效借助体外酶促反应完成特异DNA片段处理的技术体系,在技术结构内,从高温变性、低温退火到适温延伸,建立周期化分析结构,能保证循环效果,并且能有效扩展目标DNA的数量,合理性提高操作的便捷化程度。最重要的是,从上世纪开始PCR技术就被广泛应用在微生物检测工作中,尤其是应用在乳酸菌以及双歧杆菌检测项目中,也可对酒精类产品中的酵母菌进行处理和分析。
二、衍生PCR技术
伴随着科学技术的不断发展和进步,有效整合PCR技术成为了社会各界关注的焦点,PCR技术和其他新型技术的融合发展,逐渐开始形成衍生PCR技术,包括实时荧光PCR技术、PCR变性梯度凝胶电泳技术、多重引物PCR技术等,都能应用在不同的检测领域内。
实时荧光PCR技术。主要应用在食品细菌检验工作中,相较于传统的常规化PCR技术,实时荧光PCR技术的特异性较强,且整体技术的污染程度低,能有效对细菌进行合理性分析和鉴定,并且它的自动化程度也较高。目前,实时荧光PCR技术主要用在致病细菌、霉菌以及酵母菌鉴定过程中,能建立定性分析和定量分析,提高整体技术管理和数据鉴定工作的合理性,为后续食品安全管理工作提供基础的保障,具有一定的研究意义和推广价值。
PCR变性梯度凝胶电泳技术。主要是将传统PCR技术和变形梯度凝胶电泳分析结构进行融合,能有效整合新型检测技术,确保充分完成电泳管理,有效形成技术模式。PCR变性梯度凝胶电泳技术能有效提高电泳技术体系的精确度,并且完善碱基差异化DNA片段管理,也能对碱基片段进行合理性分离。最重要的是,PCR变性梯度凝胶电泳技术能检测一些不能培养的细菌,而且检测率较高、重复性较强。目前,PCR变性梯度凝胶电泳技术主要用于对发酵类食品或是酿酒过程进行检测。
多重引物PCR技术。也被称为复合PCR技术,其能在同一个PCR反应体系中添加引物数量,有效提高操作的时效性,目前主要用于对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等的检测。
三、核酸探针技术
在分子生物学基础上,有效提高生物特异性和灵敏度成为了社会各界关注的焦点,核酸探针技术便应运而生。核酸探针技术主要是借助同位素等对已知核苷酸序列的DNA片段进行有效的标记,并且将其加入到变形被检的DNA中,其能在一定条件下完成同源序列DNA的杂交双链处理。利用核酸探针技术能依托核酸分子中核苷酸的成分差异判定DNA探针,有效完成微生物反应探针处理和DNA杂交反应。