杂志汇中国食品

　摘要：二嗪磷别名二嗪农、地亚农，是具备触杀、胃毒和一定内吸作用的有机磷杀虫剂，广泛应用于菜青虫、地下害虫等多种害虫的防治。但在2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，二嗪磷被列在2A类致癌物清单中，因此针对该农药的检测工作显得至关重要。基于此，本文围绕二嗪磷残留的气相色谱法分析开展了深入研究，同时就国标GB/T 5009.1072003植物性食品中二嗪磷残留量的测定方法的标准操作程序进行了确认分析，希望研究内容能够为二嗪磷农残检测在领域提供一定帮助。

一、二嗪磷残留的气相色谱法分析

实验方法。（1）仪器与试剂。实验用仪器主要包括HP-6890气相色谱仪带氢火焰检测器、UITRA-TUR-RAX匀浆机、旋转蒸发仪、KQ5200DE数控超声波清洗器，色谱柱选用OV-17毛细管柱（30.0m×0.32mm×0.5μm）。试剂主要包括99.0%二嗪磷标样、丙酮（色谱纯）、Celite545助滤剂、乙酸乙酯（分析纯）、二氯甲烷（分析纯）、经600℃灼烧4h的无水Na₂SO₄（分析纯）、活性炭，其中活性炭的制备需使用加热煮沸1h的浓HCL，并使用蒸馏水进行中性处理，最终经600℃灼烧4h获得。

（2）气相色谱操作条件与操作方法。进样口温度、检测器温度分别控制均控为250℃，起始温度则控制为150℃（保持2min），以20℃/min速度升温至180℃（保持3min），以10℃/min速度升温至250℃（保持6min），气体流速为10mL/min（氮气N2）、150mL/min（氢气H₂）、80mL/min（空气Air）、30mL/min（尾吹），进样体积为1μL，采用不分流进样、保留时间定性，外标法定量。

结果讨论。相较于常见的提取溶剂，本次实验选用的二氯甲烷提取溶剂在二嗪磷提取率、净化难易度层面具备显著优势，净化方法的选择也具备淋洗速度快、净化质量优秀等特点。在标准曲线的绘制中，采用上述方法进行样品的处理，在应用丙酮定容获得2中丙酮基质溶液后，即可称取0.01g的二嗪磷标准品配置成2种质量浓度为100mg/L的标准溶液，由此逐级稀释为0.01mg/L、0.01mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/ L、10mg/L的系列标准工作溶液，并按照上文方式分别进样，重复3次，即可完成标准曲线的绘制，而通过具体计算，可求得质量浓度（x）与峰面积（y）的线性回归方程，即y=57326x-9846、y=55470x+1813，白术空白基质配制标准溶液系数R²为0.999，而结合回归分析可最终求得质量浓度在0.01mg/-10mg/L之间的二嗪磷具有良好线性关系。

二、国标中二嗪磷残留量的测定方法的标准操作程序确认分析

GB/T 5009.107-2003是由卫生部在2003年8月11日发布，2004年1月1日正式实施的植物性食品中二嗪磷残留量的测定方法，本标准适用于使用过二嗪磷农药制剂的谷物、蔬菜、水果等植物性食品的残留量测定。检出限为0.01mg/kg，目前广泛应用在二嗪磷残留量的检验过程中。其原理为含有机磷的试样在富氢焰上燃烧，以氢磷氧碎片的形式，放射出波长526nm的特征光，这种特征光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。试样的峰高与标准品的峰高相比，计算出试样相当的含量。

1.实验方法。（1）仪器与试剂。实验用仪器主要包括粉碎机、组织捣碎机、旋转蒸发仪、气相色谱仪，附带FPD（含P滤光片）。实验用仪器主要包括：丙酮、无水硫酸钠、二氯甲烷、氯化钠、二嗪磷（diazinon）标准品、二嗪磷标准溶液的制备：用丙酮配制成1mg/mL标准储备液，保存在4℃冰箱中，使用时用丙酮稀释成1μg/mL的标准使用液。

（2）操作条件与操作方法。

①试样提取。GB 5009.107-2003检验方法的分析选择使用稻米、玉米及青菜作为试样，具体的样品制备如下所示：

稻米：称取5g米样于50mL具塞锥瓶中，加10mL丙酮，振摇30min，放置过夜，无需净化待测。

称取10g玉米样于100mL具塞锥瓶中，加30mL丙酮，振摇30min，放置过夜，经盛有无水硫酸钠的滤纸过滤，取15mL滤液浓缩至2mL，定容待测。

称取20g试样，加40mL丙酮，振荡提取30min，过滤，用丙酮洗涤，滤液与洗涤液合并移至250mL分液漏斗中待测。

②净化。向上述滤液中不断加入氯化钠并猛烈振摇，直到氯化钠溶液呈过饱和状态，静置10-15min，使丙酮从水相中盐析出来。水相再用30mL二氯甲烷振摇提取2min，静置分层。取下层二氯甲烷提取液与丙酮层合并。合并液经20g-30g的无水硫酸钠玻璃漏斗除水，再以约40mL二氯甲烷洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤液合并入提取液中，减压浓缩，有水分再次去掉水分。

按国标要求的检测步骤执行，完成上述制备即完成试样制备。但在实际操作中发现，此时制备的样品水分含量过高，导致最终结果收回率仅有50%左右，检测数据并不能代表样品实际情况。继而后续浓缩剩余的水分再以20mL-30mL的二氯甲烷复溶，再次过无水硫酸钠脱水，后用20mL-30mL的二氯甲烷洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤液和滤液合并再次进行减压浓缩近干，二氯甲烷定容至2mL，此为待测样品。

③气相色谱测定。

色谱条件：色谱柱：Rtx-1701（30m×0.25μm×0.25mm）

色谱柱温度：80℃保持2.0min，20℃/min升到150℃，10℃/min升到250℃，8℃/min升到270℃，保持8min。

进样口温度：250℃；

FPD检测器温度：250℃；

载气：氮气，流速1.50ml/min；

进样方式：不分流进样。

④测定。取浓度分别为0.0μg/mL、0.1μg/ mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL、1.0μg/mL的二嗪磷标准溶液注入色谱仪中，可测得不同浓度的二嗪磷的峰高。以二嗪磷含量为横坐标，峰高为纵坐标绘制标准曲线，根据试样的峰高定量。

⑤ 计算。按下式计算:

式中：

x——试样中二嗪磷的含量，单位为毫克每千克（mg/Kg）；

v——试样提取液浓缩定容体积，单位为毫升（mL）；

m——试样质量，单位为克（g）；

d——稀释倍数；

c——曲线值，单位为微克每毫升（μg/mL）

2.精密度。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算是平均值的20%。

3.检测质量控制。水果、蔬菜样品净化时加入氯化钠要达到饱和，然后静置充分长的时间使得丙酮能尽可能的从水相中盐析出来。第一次减压浓缩时剩余的水分要再次用溶剂复溶提取，防止损失剩余水分中的目标物，然后过无水硫酸钠脱水，浓缩定容。若样品中水分含量过少，水相和丙酮层分层不明显，可加入适量的水溶解部分氯化钠。

加标试验：加标量为0.5μg，加标回收率分别为：稻米95%-98%、玉米95%－98%、青菜98%－99%。

4.结果讨论。GB 5009.107-2003是较为常用的二嗪磷检测方法，该方法操作较为便利，时间也便于控制。针对制样后水分含量过高的问题，经过调整添加后续操作，回收率可达到95%以上，满足日常检测需求。

综上所述，气相色谱法可较好满足二嗪磷残留分析需要，在此基础上，本文涉及的气相色谱操作条件与操作方法、标准溶液与试样溶液配制、样品制备等内容，则提供了可行性较高的二嗪磷气相色谱法分析路径，而为了进一步提高分析质量，学界还应围绕二嗪磷残留分析开展更深入的研究。